在定量分析方法中，由于很多物质在紫外光-可见光区有吸收，可以借助比色法进行测定，因此光度分析法广泛的应用于地质、冶金、化工、医学、食品、制药及环境监测等行业。在光度分析法中，比色皿的选择、使用及维护对分析结果有着重要的影响，下面我们就从这些角度来聊聊比色皿。

一、比色皿的分类

比色皿的制造工艺有两种，一种是粘合剂粘合而成，另一种是高温熔融而成。比色皿的材料通常来源于石英、熔凝硅石和光学玻璃。玻璃比色皿对紫外线几乎全部吸收，吸光度非常大。而石英比色皿的吸光度则小得多。常用比色的形状有方形、矩形和圆筒形，容量一般为几毫升，也有用于少量试样的微型或超微型毛细管皿。另外还有高、低温恒比色皿。

二、比色血的选择

分析波长在350nm以上时可选用玻璃或石英比色，在350nm以下时须使用石英比色。比色皿有不同的光程长度，一常用的有0.5、1、2、3、125px，选择哪种光程长度的比色应视分析样品的吸光度而定。当比色液的颜色较淡时，应选用光程长度较大的如50px、75px比色皿；当比色液的颜色较深时，应选用光程长度较小的如12.5px、25px比色皿，以使所测溶液的吸光度在0.1~0.7之间。

三、比色皿的校正

比色皿有方向性。有些比色皿上标有方向标记，使用时必须注意。无方向标记的比色皿应予以校正。校正时要先确定方向并作好标记以减少测定误差。比色皿的校正方法是：将纯净的蒸馆水注入比色皿中，把其中吸收最小的比色皿的吸光度置为零，并以此为基准，测出其它比色皿的相对吸光度。测定比色液时，应将其吸光度减去比色皿的吸光度。同一组比色相互间的差异应小于测定误差。在测定同一溶液时，吸光度差值应小于0.5%，否则应对差值进行校正。

比色皿的光程长度也需校正，校正时可将吸光度约为0.4的溶液分别注入校正皿和具有准确光程长度的标准比色皿中，测定吸光度。以标准比色的吸光度为1.00，求出校正比色皿吸光度的相对值作为该比色皿的校正系数。测定比色液时，可将所测得的吸光度乘以该皿的校正系数以得到实际吸光度值。

四、比色皿的使用与维护

拿取比色皿时不得接触透光面，否则指纹、油污会弄脏窗口而使比色皿改变透光性能。使用比色皿时应于测试前将待测液倒入比色皿洗涤三次(注意不要产生气泡)。比色外的水和溶液可先用滤纸吸干，再用镜头纸或软绸布擦拭，不能在电炉或火焰上加热干燥。比色皿在光路中应垂直于光束方向，以减少反射损失。

每次使用完毕的比色皿，一般先用自来水冲洗再用蒸馆水冲洗三次倒置于干净的滤纸上晾干，然后存放于比色皿盒中。如果比色皿被有机物污染宜用盐酸-乙醇(1+2)混合液浸洗，也可用相应的有机溶剂浸泡洗涤。如：油脂污染可用石油醚浸洗，铬天青显色剂污染可用硝酸(1+2)浸洗等，比色血不可用碱液洗涤，也不能用硬布毛刷刷洗。

含有能腐蚀玻璃物质的溶液，如氢氟酸氟化物的高浓度溶液，不可放入比色中。含氟离子浓度低的溶液也不宜在血中久置。比色质地较脆石英皿尤甚，使用时动作要轻，切勿摔碰。

五、比色皿的材质选择

比色皿选择或使用不当，造成无法测量或引起测量误差的现象在实验中经常出现，这一问题又很容易被实验入员忽视。

紫外区的定义为190-400nm，石英比色皿可用于190-900nm，玻璃比色皿用于360-900nm，紫外区的一定要用石英比色皿，必须配置紫外/可见分光光度计，否则低波长段不能分析。对于一般的非光学专业入员，用眼睛是不能分开石英比色皿和玻璃比色皿的。但两者硬度差别很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大（绝对值）几十倍，如果把两个对磨，石英比色皿将很少被磨损，而玻璃比色皿磨损非常大。

由于石英比色皿的透光范围从0.12-4.5微米(120-450nm)，广泛的谱段范围内没有任何吸收峰。而玻璃比色皿只有0.4—4微米（400-4000nm），且有许多离子吸收峰。所以，石英比色皿要比玻璃比色皿优越的多，化验数据更准确、更可靠。

用手摸或者肉眼就能观察出来，只有光学技术入员凭经验“靠肉眼比较折光率差别”可以准确判定，他们肉眼观察微弱的离子吸收现象，靠经验评价也能区分。但是，对没有经验的入员来说，极易发生判定错误。

方法1：

石英比色皿上有一个Q字样(quartz石英)，而玻璃的上面有一个G字样(glass玻璃)，从字面上可以直接区分两种比色皿，如果字样已经没有啦，只能上机在紫外区实测啦，在紫外区透过率大是石英的，几乎没有透过率的是玻璃的。市面上卖的比色皿造型不是完全一样的，有的没有石英标识。可在紫外波长下检测空比色皿的吸光度，玻璃的吸光度要比石英的大。

方法2：

将光度计的波长设定为250nm，样品室内不放任何物品，调零，然后将比色皿置于样品道一侧，吸光值小于0.07Abs的是石英材料，反之是玻璃材料。注：如果吸光值稍稍大于0.07Abs的话，有可能也是石英材料的，只不过可能是内壁没有洗净之故。

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